Molekulargenetische Diagnostik
GM2 Gangliosidosen: Morbus Sandhoff
OMIM: 26800 Sandhoff, 606873 (HEXB), 272800 (Tay Sachs), 606869 (HEXA), 272750 (GM2-Gangliosidosis, AB Variante), 272750 (GM2AP)
Hintergrund
Bei Morbus Sandhoff handelt es sich um eine angeborene Erkrankung aus der Gruppe der lysosomalen Speicherkrankheiten. Zum intrazellulären Abbau von GM2-Gangliosiden werden zwei Enzyme benötigt: Hexosaminidase A und B. Hexosaminidase A ist zusammengesetzt aus einer α-Untereinheit (kodiert vom HEXA-Gen) und einer β-Untereinheit (kodiert vom HEXB-Gen), während die Hexosaminidase B aus zwei β-Untereinheiten besteht. Mutationen im HEXA-Gen, die zum Verlust der Enzymaktivität der Hexosaminidase A führen, sind verantwortlich für die klassische Tay Sachs-Erkrankung, während M. Sandhoff durch Mutationen im HEXB-Gen, die zum Verlust der Enzymaktivität von Hexosaminidase A und B führen, verursacht wird. Mutationen im Gen, das für das GM2-Aktivatorprotein kodiert (GM2AP), liegen der sog. AB-Variante der Tay Sachs-Erkrankung zugrunde.
Bei der infantilen Form des M. Sandhoff zeigen betroffene Kinder nach unauffälliger Neugeborenenperiode in der Regel ab dem 3.-5. Lebensmonat eine Entwicklungsverzögerung mit muskulärer Hypotonie, vermehrten Schreckreaktionen und Nichterreichen der motorischen Meilensteine. Im Verlauf werden Krampfanfälle, Makrocephalie, abnehmendes Sehvermögen bis zur Erblindung, fortschreitender Verlust der motorischen und geistigen Fähigkeiten und Demenz beobachtet. Ein typischer Befund bei der Untersuchung des Augenhintergrundes ist der sog. „kirschrote Fleck“ in der Retina, der sowohl bei M. Tay Sachs als auch bei M. Sandhoff beobachtet wird. Der Tod tritt meist zwischen dem 3.-5. Lebensjahr ein.
Bei der juvenilen Verlaufsform werden die ersten Symptome zwischen dem 2.-5. Lebensjahr beobachtet. Der Verlust der motorischen und geistigen Fähigkeiten schreitet langsamer voran, und die Lebenserwartung liegt bei ?15-20 Jahren. Die adulte Form ist durch variable neurologische Auffälligkeiten und psychiatrische Symptome gekennzeichnet, wobei Sehvermögen und Intelligenz in einigen Fällen unbeeinträchtigt sein können. Schweregrad und Verlaufsform der Erkrankung sind eng mit der Hexosaminidase A-Restaktivität korreliert.
Bei klinischem Verdacht auf M. Tay-Sachs oder M. Sandhoff kommt der Bestimmung der Enzymaktivitäten der Hexosaminidase A und B eine wichtige diagnostische Rolle zu. Diese Bestimmung ist in Serum, Leukozyten und Fibroblastenkulturen sowie ggf. aus CVS-Material und Amnionzellkulturen möglich. Eine fehlende oder stark verminderte Aktivität der Hexosaminidase A bei normaler Aktivität der Hexosaminidase B deutet auf M. Tay Sachs hin, während bei M. Sandhoff die Aktivität beider Enzyme fehlt bzw. deutlich vermindert ist. Bei der AB-Variante sind normale Enzymaktivitäten zu finden.
M. Sandhoff folgt einem autosomal-rezessiven Erbgang, d.h. die Eltern der Patienten sind in der Regel jeweils heterozygote Anlageträger, zeigen aber selbst keine Symptome. Das statistische Erkrankungsrisiko für jedes Kind solcher Paare beträgt 25 %. Die molekulargenetische Diagnose erfolgt durch direkte Sequenzanalyse der 14 Exons des HEXB-Gens. Eine Unterscheidung der klinischen Verlaufsformen anhand des molekulargenetischen Befunds ist nicht möglich.
Erforderliches Probenmaterial
- 5-10 ml EDTA-Blut (2 Proben)
EDTA-Blutproben für molekulargenetische Untersuchungen können in der Regel ungekühlt mit der Post verschickt werden.
Bitte beschriften Sie alle Probengefäße eindeutig mit Namen und Geburtsdatum des Patienten. Nicht eindeutig beschriftete Proben können nicht bearbeitet werden. Bitte benutzen Sie unsere Anforderungsscheine (incl. Patienteneinverständnis-Erklärung). Hier können alle erforderlichen Angaben zur Anforderung von Untersuchungen eingetragen werden.
Schriftliche Einwilligungserklärung gemäß GenDG ist erforderlich!
Bei humangenetischen Untersuchungen ist wichtig, ob es sich um eine diagnostische Abklärung bei einem Erkrankten oder um (prädiktive) Testung einer Risikoperson auf Anlageträgerschaft für eine in der Familie bekannte Mutation handelt. Bei prädiktiven genetischen Untersuchungen ist gemäß GenDG eine vorherige genetische Beratung verpflichtend gefordert.
Methode
Aus der Blutprobe wird genomische DNA isoliert und für die Mutationsanalyse die 14 Exons des HEXB-Gens (NM_000521) mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR) amplifiziert und unter Einschluss der konservierten Exon/Intron-Grenzen direkt sequenziert. Zusätzlich wird ein Duplikations- bzw. Deletions-screening mittels Multiplex ligation dependent probe amplification (MLPA) des HEXB-Gens (Sobek et al. 2012) durchgeführt.
Dauer der Untersuchung: bis zu 4 Wochen nach Probeneingang
Kosten: auf Anfrage
Akkreditiertes Verfahren nach DIN EN ISO 15189:2014
